纳米粒子的制备选用化学共沉淀法制备Fe纳米粒子[30]，详细过程如下:用去离子水别离制造1.0mol/L的FeCI通入氮气进行维护，持续机械拌和，置于水浴中升温并坚持在60下，然后快速滴加氨水(25-28%wlw)至pH=10-11，溶液由棕色变为黑色即可。然后升温至800C坚持1h。最终在室温下冷却，用永久磁体将产品从溶液中别离，用蒸馏水重复洗至中性，最终将产品于室温下线h，即得Fe/SiOx复合粒子的制备Fe/Si0X复合粒子的制备参照文献方法来进行[31J。详细过程如下:称取2gFe纳米粒子于250m1的三口瓶中，参加160m1乙醇，40m1水和5ml氨水，超声波涣散1h后，室温下机械拌和，一起缓慢滴加一定量的正硅酸乙醋CTEOS反响持续进行12h后，用永久磁体将产品从溶液中别离，用蒸馏水重复洗至中性，一起清洗后的溶液不会变污浊，然后参加一定量1mol/1的盐酸，浸泡产品12h}磁别离后，再用蒸馏水洗至中性，最终将产品于室温下线h，即得FeAPTS对Fe/SiOx复合粒子的外表改性-氨丙基三乙氧基硅烷CAPTS)对Fe3O4纳米粒子的化学改性是经过硅烷的乙氧基水解后构成的硅经基与Fe/SiOx复合粒子外表的硅羟基缩合而完结。详细试验过程如下:称取1gFe/SiO型复合粒子于60m1无水乙醇的三口瓶中，超声波涣散1小时后，参加6m1NH3}H20，再用超声波涣散lmin，然后通氮气维护，在匀速机械拌和下滴加4m1氨丙基三乙氧基硅烷，一起水浴升温至50并坚持8小时。最终室温下天然冷却，用永久磁体将产品从溶液中别离，用蒸馏水重复洗至中性，一起以倾倒法将硅烷的自缩聚物除掉，再用乙醇洗刷产品数次，以除掉产品中未反响的硅烷，最终将产品于室温下线h，即得APTS化学改性的Fe30a}Si0、复合粒子(记作FeAPTS2.0g，参加30m1无水DMF中超声涣散，向其间参加适量的三乙胺，然后再冰浴冷却下向其间滴加含有3m1氯乙酰氯的DMF溶液5.0mI，并控制在半小时内加完。待加完后，撤去冰浴加热回流反响l0h,最终用乙醇超声洗刷并真空枯燥至恒重。-Br的制备选用Stober法制备纳米SiO向250mL的单口烧瓶中参加200mL无水乙醇，400C恒温中速拌和2h。参加10.5mL氨水(质量分数25%)，拌和2min后，再参加l0mL正硅酸四乙酯，敏捷拌和5min后再中速拌和反响l0h}溶液色彩变成半透明浅蓝色，标明已生成纳米级SiO向反响系统中参加2mL硅烷偶联剂KH-550，持续拌和2h后再升温至85.0回流3h，使SiO外表很多的活性基团由羟基转变为胺基。将上述反响系统进行离心，离心出的纳米SiO别离用无水乙醇和甲苯各洗两次，最终再涣散到甲苯中。在冰水浴条件下向系统中参加2g三乙胺，然后用恒压滴液漏斗缓慢滴入4g1h后，再于常温下反响24h。反响完毕，向烧瓶中加适量去离子水去盐，离心，将产品用丙酮洗刷三次，最终于450线h。即得外表键接有ATRP引发剂的SiO-Br纳米粒子。5.磁性Fe304/SiOx-g-P(GMA)复合粒子制备FeSiOx-g-P(GMA)复合粒子是经过ATRP法制备的。称取0.5g上述处理的含有引发官能团的纳米粒子，超声涣散于20m1混合溶液〔DMF/water(1:1,通入N2半小时以便扫除系统中所含的氧气，然后参加【GMA]/[CuCl]/[CuCl]/[Bpy](邻二吡啶)份额为100:1:0.2:2室温下拌和反响12h，反响完毕后，用永久磁体将产品从溶液中别离，并用丙酮抽提48h除掉未反响的GMA以及杂质，最终将产品于室温下线/SiOX-g-P(GMA)复合粒子。磁性Fe/SiOxg-P(GMA)复合粒子的环氧基含量的测定选用硫代硫酸钠法[32,33〕进行6.磁性Fe/SiOx-g-P(GMA)载体固定化脂肪酶的制备6.1固定化脂肪酶的制备因为磁性微球自身带有反响性环氧基基团，它能够与酶分子上的活性基团(如~NH、-SH和一OH)在温文条件下反响，所以在固定化酶进程中不再需求事前活化载体，可将载体直接参加到酶溶液中进行固定化。为得到最佳的生机收回，试验中对固定化时刻、溶液的pH值和给酶量等条件进行了优化。详细操作的流程是:首先将1g的磁性微球置于在50mI的磷酸缓冲液(0.1M}pH=7.0)中浸泡24小时，然后磁别离，接着将上述浸泡后的载体参加到SOmI0.2%的脂肪酶磷酸缓冲液中(0.1M}pH=7.0)中，一起在30下用磁力拌和器缓慢地拌和反响8小时，最终磁别离并用一定量的磷酸缓冲液((0.1M,pH=7.0)洗刷所得的固定化酶。滤液和洗刷液兼并，用来测定酶的残留生机，将所得的固定化酶放置在冰箱内40C下保存。